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          細胞STR鑒定檢測服務

          更新時間:2021-10-19

          簡要描述:

          細胞STR鑒定檢測服務
          送樣要求:
          1.基因組DNA: OD 260/280 在1.8~2.0之間, 濃度≥50ng/μl,體積≥20μl;
          2.組織塊:介于綠豆粒~黃豆粒大小之間即可,
          新鮮細胞:(1)細胞數≥106;(2)貼壁細胞經胰蛋白酶消化后,離心收集細胞沉淀;(3)懸浮細胞直接離心收集細胞沉淀;(4)PBS清洗細胞沉淀,盡可能去除培養基與胰酶

          細胞STR鑒定檢測服務

          細胞STR鑒定檢測服務



          送樣要求:

          1. 基因組DNA: OD 260/280 在1.8~2.0之間, 濃度≥50ng/μl,體積≥20μl;

          2. 組織塊:介于綠豆粒~黃豆粒大小之間即可,

          3. 新鮮細胞:(1)細胞數≥106;(2)貼壁細胞經胰蛋白酶消化后,離心收集細胞沉淀;(3)懸浮細胞直接離心收集細胞沉淀;(4)PBS清洗細胞沉淀,盡可能去除培養基與胰酶;

          4. 凍存細胞:細胞數≥106,凍存細胞從液氮罐中,37℃水浴復蘇,融化后離心收集細胞沉淀,盡可能去除凍存液,否則會影響DNA抽提質量;

          5. 樣本寄送:應在送樣包裹中放置冰袋或干冰,建議順豐快遞;

          6. 為了保證DNA抽提質量,確保細胞在消化或凍存前,細胞狀態良好,處于生長對數期;

          不建議以細胞懸液或細胞培養瓶形式寄送樣本

           

           

          細胞STR鑒定樣本收集步驟參考

           

          收集懸浮細胞沉淀步驟:

          1.將細胞懸液轉移至離心管中

          2. 200X g,離心10min,收集細胞

          3. 移除上清液,用PBS清洗細胞沉淀1-2

          4. 最后200X g,離心10min,收集細胞沉淀

           

          收集貼壁細胞沉淀步驟:

          1.移除細胞培養基。

          2.沿著培養皿壁緩慢加入PBS(無鈣鎂離子),勿將細胞沖離培養皿,溫和晃動培養皿,清洗細胞表面。

          3.移除PBS。

          4.加入細胞消化液(如胰蛋白酶等),使消化液能覆蓋所有細胞。在37℃孵育2-3min,溫和晃動培養皿知道細胞開始剝離培養皿。

          5.加入培養基終止消化,溫和重懸細胞

          6.200X g,離心10min,收集細胞

          7.移除上清液,用PBS清洗細胞沉淀1-2

          8.最后200X g,離心10min,收集細胞沉淀

           

          支原體檢測樣本制備:建議送檢上清

          1.貼壁細胞上清液或細胞沉淀制備

          貼壁細胞上清制備:在無抗生素及其它抑菌或滅菌物質條件下培養 3 天,匯合度達到90% 左右時,直接吸  1.0ml 細胞培養上清液移至  1.5ml 離心管中。

          貼壁細胞沉淀制備上述(a貼壁細胞收取完上清后,加入1ml PBS,使用細胞刮刮取細胞,吸取轉移至1.5ml離心管,12000rpm離心沉淀細胞。(如果使用胰酶消化細胞,需要10ml PBS洗三遍后,1ml PBS重懸沉淀,然后轉移至1.5ml離心管,12000rpm離心獲得細胞沉淀。)

          2.懸浮細胞上清液或細胞沉淀制備

          懸浮細胞上清制備:在無抗生素及其它抑菌或滅菌物質條件下培養 3 天,500g離心5min,直接吸  1.0ml 細胞培養上清液移至  2ml 離心管中。

          懸浮細胞沉淀制備上述(c吸取上清液后的沉淀,加入1ml PBS重懸沉淀,然后轉移至1.5ml離心管,12000rpm離心10min,棄上清,獲得細胞沉淀。

           


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