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          鈣熒光探針Fluo-8, AM

          更新時間:2019-05-22

          簡要描述:

          鈣熒光探針Fluo-8, AM
          英文名:1-[2-Amino-5-(6-hydroxy-3-oxo-9-xanthenyl)phenoxy]-2-(2-amino-5-methylphenoxy)ethane-N,N,N’,N’-tetraacetic acid, pentaacetoxymethyl ester
          分子式:C51H52N2O23
          分子量:1060.30

          鈣熒光探針Fluo-8, AM

          CAT#21080

          中文名:鈣熒光探針Fluo-8, AM

          英文名:1-[2-Amino-5-(6-hydroxy-3-oxo-9-xanthenyl)phenoxy]-2-(2-amino-5-methylphenoxy)ethane-N,N,N’,N’-tetraacetic acid, pentaacetoxymethyl ester

          分子式:C51H52N2O23

          分子量:1060.30.

          1 mg¥3,095
          5×50 µg¥1,195
          10×50 µg¥2,150
          20×50 µg¥3,650

          性質:

          1. 外觀:橙紅色粉末

          2. 純度:≥90%(HPLC)

          3. 產品描述:

          Fluo-8, AM是常用的檢測細胞內鈣離子濃度的熒光探針之一。它穿透細胞膜進入細胞后被細胞內的酯酶剪切形成Fluo-8,從而被滯留在細胞內,Fluo-8若以游離配體形式存在時幾乎是非熒光性的,但是當它與細胞內鈣離子結合后可以產生較強的熒光,大激發波長為490nm,大發射波長為514nm??梢允褂眉す夤簿劢癸@微鏡或流式細胞儀檢測細胞內鈣離子濃度的變化。

          儲存條件:-20℃干燥避光保存,有效期一年

          4. 操作說明(for Human T cells)*
          (1) 試劑
          2 mM的Fluo-8, AM/DMSO(將1mg Fluo-8, AM溶于442µL DMSO)
          Pluronic F127
          Hanks•balanced salt solution(HBSS)
          HEPES buffer saline(10mM HEPES,1mM Na2HPO4,137mM NaCl,5mM KCl,1mM CaCl2,0.5mM MgCl2,5mM glucose,0.1% BSA,pH 7.4)
          (2) 操作
          ①. 向Fluo-8, AM/DMSO溶液中加入16.5mg Pluronic F127,Pluronic F127可以    防止Fluo-8, AM在HBSS中聚合并能幫助其進入細胞。
          ②. 用HBSS稀釋Fluo-8, AM溶液,制備4µM的Fluo-8, AM工作液。
          ③. 將Fluo-8, AM工作液加入細胞,在37℃培養20分鐘。
          ④. 加入5倍體積的含有1%胎牛血清的HBSS,再繼續培養40分鐘。
          ⑤. 用HEPES buffer saline洗滌細胞3次,然后用HEPES buffer saline使細胞重懸浮,制成1×105 cells/mL的溶液。
          ⑥. 37℃下培養10分鐘,然后用該細胞進行熒光鈣離子檢測。激發波長490nm,發射波長514nm。 
          *標記的條件因細胞種類而異,在每次實驗前,請先確定條件。以上方法僅供參考。

           

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